Як виконувати серійні розведення

Зміст

• етапи
• Спосіб 1 Виконайте просте розведення
• Спосіб 2 Обчисліть кінцевий коефіцієнт розведення та концентрацію

У хімії розведення складається з зменшення концентрації даного розчину. Серійне розведення - це просто повторне розведення вихідного розчину для швидкого посилення коефіцієнта розведення. Цей тип розведення часто проводиться під час експериментів, що вимагають сильно розведених розчинів та високої точності, таких як криві концентрації в логарифмічній шкалі або ті, що дозволяють обчислювати щільність бактерій у певних середовищах. Вони дуже часто виконуються в біохімії, мікробіології, фармакології або хімії.

етапи

Спосіб 1 Виконайте просте розведення

1. 
   

   
   Визначте правильну розріджувальну рідину (або розчинник). Вибір розчинника дуже важливий і залежить від розчину, який ви хочете розвести. Розріджувач часто є дистильованою водою, але це не систематично. Таким чином, для розчину, що містить бактерії або клітини, замість цього використовується культуральне середовище. Для серійного розведення використовується однаковий розчинник у всіх пробірках.
   • Якщо ви не знаєте, який розчинник використовувати, зверніться за допомогою до компетентної особи або подивіться в Інтернеті, що люди повинні зробити для подібного досвіду.

2. 
   

   
   Підготуйте кілька пробірок, що містять 9 мл рідини для розведення. Ці пробірки будуть використовуватися для послідовного розведення. Принцип простий: ви візьмете зразок вихідного розчину і перенесіть його в наступну пробірку, потім візьмете зразок цієї пробірки, щоб покласти її в наступну і т.д.
   • Перш ніж розпочати розведення, бажано заздалегідь визначити пробірки, щоб уникнути плутанини пізніше.
   • У кожній пробірці у вас буде концентрація на десять нижче, ніж у попередній. Перша пробірка буде містити розведений розчин у десятій, другій, сотійній, третій, тисячній тощо. Заздалегідь визначте кількість розведень, щоб уникнути отримання більше пробірок, ніж необхідно, та відходів розріджувача без потреби.

3. 
   

   
   
   
   Приготуйте пробірку з маминим розчином. Покладіть не менше 2 мл. Мінімальна кількість вихідного розчину для серійного розведення - один мілілітр. Дайте 2 мл для можливого другого розведення. Це тюбик материнського розчину, ви можете позначити його "SM".
   • Перш ніж розпочати серійне розведення, добре перемішайте вихідний розчин.

4. 
   

   
   Зробіть перше розведення. Піпеткуйте 1 мл вихідного розчину в пробірку з маркуванням "SM" і перенесіть цю кількість у мітку пробірки. 1/10 який вже містить 9 мл рідини для розведення. Перемішують до отримання однорідного розчину. У цій пробірці зараз знаходиться 10 мл розчину: 1 мл вихідного розчину та 9 мл рідини для розведення. Цей новий розчин в десять разів менш концентрований, ніж попередній.

5. 
   

   
   
   
   Виконайте друге розведення. У другому серійному розведенні ви будете набирати 1 мл міченого розчину пробірки 1/10 і ти будеш наливати його в трубочку 1/100 який вже містить 9 мл рідини для розведення. Трубка 1/10 перед відбором проб добре змішати. Як тільки передача буде зроблена, добре перемішайте трубочку 1/100, Розчин з маркованої пробірки 1/10 в 10 разів більш концентрований, ніж у міченої трубки 1/100.

6. 
   

   
   Повторіть цю маніпуляцію при необхідності. Цю процедуру можна повторити стільки разів, скільки бажано, до досягнення бажаного розведення. Для експерименту, що включає криві концентрації, можна отримати серію розчинів з розведеннями до одиниці, десятої (1/10), сотої (1/100) або тисячної (1/1000).

Спосіб 2 Обчисліть кінцевий коефіцієнт розведення та концентрацію

1. 
   

   
   Обчисліть співвідношення остаточне розведення після серійного розведення. Загальне співвідношення розведення отримують шляхом множення коефіцієнта розведення на себе стільки разів, скільки є розведення. Математично формула така: D_T = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_Nз D_T що представляє загальний коефіцієнт розведення та D_N, співвідношення розведення.
   • Отже, припустимо, що ви проводите 1/10 розведення рідини 4 рази поспіль. У формулі замініть коефіцієнт розведення на його значення: D_T = 10 х 10 х 10 х 10 = 10000
   • Кінцевий коефіцієнт розведення четвертої пробірки у вашому серійному розведенні становить 1/10 000. Концентрація розчину останньої пробірки зараз у 10 000 разів нижча, ніж у вихідного розчину.

2. 
   

   
   Визначте концентрацію розчину після розведення. Щоб знайти остаточну концентрацію розчину після серійного розведення, потрібно знати початкову концентрацію. Потім формула: З_{остаточний} = С_{початкова}/ Aз З_{остаточний} що представляє кінцеву концентрацію розведеного розчину, З_{початкова}, концентрація вихідного розчину та D, співвідношення розведення, визначене заздалегідь.
   • Отже, якщо розвести клітинний розчин з концентрацією 1 000 000 клітин на мл, а коефіцієнт розведення встановлений на 1000, яка буде кінцева концентрація розведеного зразка?
   • Використовуйте формулу:
     • З_{остаточний} = С_{початкова}/ A
     • З_{остаточний} = 1 000 000/1 000
     • З_{остаточний} = 1000 клітин / мл

3. 
   

   
   Зверніть увагу на використовувані одиниці. Виконуючи розрахунки, завжди перевіряйте, чи використовуєте ви ті самі одиниці. Таким чином, якщо ви почнете з концентрації клітин на мл, ваш кінцевий результат також буде в клітинах на мл. Якщо ваша початкова концентрація знаходиться в частках на мільйон (проміле), то ваша кінцева концентрація буде частками на мільйон.